细胞工程习题 第十一章

第十一章 复习题

一、微载体与生物反应器结合在实现动物细胞大规模培养方面有怎样的优势？

微载体（Microcarrier）：是直径60-250μm的适用于贴避依赖型细胞生长的微粒。一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成。微载体与生物反应器结合在实现动物细胞大规模培养方面有以下优势：

1.模拟了体内三维生长环境，减轻了接触抑制，可以多层生长，摆脱了传统的培养瓶（管）培养限制。

2.很好地解决了生物反应器的空间分布问题，单位体积培养液的细胞产率高；培养系统占地面积和空间小；劳动强度小；放大容易，使大规模培养动物细胞成为可能。

3.把悬浮培养和贴壁培养融合在一起，兼有两者的优点；可以稍加改造利用传统生物反应器。

4.接种与收获方便；可循环、连续收获与培养，培养基利用率较高。

二、分析讨论动物细胞生物制药的优点与存在的问题。

动物细胞生物制药的优点：

1、多半可分泌到细胞外，提取纯化方便；

2、蛋白质经糖基化修饰后与天然产物更一致，适合于临床应用。

动物细胞生物制药存在的问题：

1、细胞密度低，产物浓度低；

2、大规模、长时间培养过程中分泌产物能力易丢失，或产物活性易降低；

3、动物细胞培养基、培养设备以及培养用微载体很昂贵。因此大多仅能在小规模范围内研究，难以转化为生产力；

4、目前对细胞代谢和生长动力学的研究比较欠缺；

5、在线监测水平技术不完善，限制了优良培养系统的开发。

三、举例说明动物细胞培养在生物制药中的应用。

《用微载体培养Vero细胞制备狂犬疫苗》

方法：搅拌式生物反应器培养Vero细胞，待细胞在微载体上长成单层后，用狂犬病毒aG株感染细胞。培养5d后，打开灌流收获病毒液，每天取样测定病毒滴度。经灭活后制备成试验疫苗，进行效力试验。

结果：3次培养，细胞密度均达到1X106/mL以上，病毒滴度都在106LD50以上，3批试验疫苗的效价分别达到5.88、6.49和5.98IU/mL。

结论：在生物反应罐中用微载体培养Vero细胞制备狂犬疫苗工艺合理，所获免疫原形良好，适用于工业化生产，有较好的应用前景。