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农残检测方法

2020-05-03 来源:好土汽车网
导读 农残检测方法
农残检测方法

1.农残试剂配置

缓冲溶液:取一包缓冲剂,加入500ml蒸馏水,溶解搅拌均匀,密闭、避光、阴凉处保存。 显色剂:取显色剂一瓶,加入15ml缓冲溶液溶解,4℃冰箱中保存。 底物:取底物一瓶,加入15ml蒸馏水溶解,4℃冰箱中保存。

乙酰胆碱酯酶:取乙酰胆碱酯酶一瓶,用3ml缓冲溶液溶解,4℃冰箱中保存。 注:因农残试剂生产厂家众多,使用时请以试剂说明书为准! 2.样品处理

选取有代表性的蔬菜样品,擦掉样品表面泥土,剪成1cm见方碎片,取样品1g,放入烧杯或提取瓶中,加入5ml缓冲溶液,振荡1min~2min,倒出提取液,静置3min~5min,待用。 注意:样品不可用水冲洗,应擦去表面泥土等杂物后取样。为了保证取样具有代表性,叶菜一般取来自不同植株叶片的叶尖部样本,果菜从不同个体的表皮处取样。 3.对照溶液测试

在提取瓶中加入2.5ml缓冲溶液,再加入100ul酶液、100ul显色剂,摇匀后于37℃放置15分钟(每批样品的控制时间必须一致)。15分钟后再加入100μL底物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即倒入1cm比色皿,放入仪器比色池中,将仪器调到测量界面,按操作指示面板按键区的“对照”按钮,仪器开始做对照。3分钟后仪器自动对照完成,对照完成后将对照样取出,保持仪器界面不变。

注意:对照测试必须在第一通道进行,对照测试△A应>0.3,若对照测试的结果小于以上数值时,仪器会自动提示“对照错误”,须重新做对照,以保证测量结果的准确性。(对照测试△A<0.3的原因:一是酶的活性不够,二是反应温度太低。) 4.样品溶液测试

另取干净的提取瓶,放入2.5ml样品提取液,加入100ul酶液、100ul显色剂,摇匀后于37℃放置15分钟(放置的时间与对照液放置的时间必须一致)。15分钟后再加入100μL底物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即倒入1cm比色皿,放入仪器比色池中,按操作指示面板按键区的“测量”按钮开始测量,3分钟后仪器测量完成,显示测量结果。结果以酶被抑制的程度(抑制率)表示,当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时,表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在,样品为阳性结果,阳性结果的样品需要重复检验2次以上。

对阳性结果的样品,可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。 5.说明

葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株(体)蔬菜浸提的方法,减少色素的干扰。

甲醛检测方法

1.试剂配置

甲醛试剂(一)

甲醛试剂(二):将甲醛试剂(二)①加少量热水溶解,再加入甲醛试剂(二)②,冷却后定容于50ml容量瓶

注意:所有试剂均需避光、低温(冰箱4℃)保存!甲醛试剂(一)有腐蚀性;配制好的甲醛试剂(二)可使用一个月。 2.样品处理

准确称取0.2g样品放入哈希管中,加入5滴甲醛试剂(一)和10ml蒸馏水,混匀后盖紧瓶盖,放入沸水中加热5min,取出冷却至室温,用0.45μm微孔滤膜过滤,以除去悬浮颗粒,此为待测溶液。 3.空白

取蒸馏水10ml于10ml比色管中,加入甲醛试剂(二)1ml,混合均匀,放入恒温水浴锅中50℃加热15分钟,取出冷却至室温,移入1cm比色皿中,放入仪器相应比色池中,按操作指示面板区的“对照”键进行对照,对照完成后,仪器会自动记录对照结果,并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。 4.测量

移取处理好的样品溶液5ml于10ml比色管中,加入蒸馏水定容至10ml,然后再加入甲醛试剂(二)1ml,混合均匀,放入恒温水浴锅中50℃加热15分钟,取出冷却至室温,移入1 cm比色皿中,放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量,测量完成后,仪器自动显示样品中甲醛浓度值X(mg/kg)。

吊白块检测方法

1.试剂配置

吊白块试剂(一)

吊白块试剂(二):将吊白块试剂(二)①加少量热水溶解,再加入吊白块试剂(二)②,冷却后定容于50ml容量瓶

注意:所有试剂均需避光、低温(冰箱4℃)保存!吊白块试剂(一)有腐蚀性;配制好的吊

白块试剂(二)可使用一个月。 2.样品处理

准确称取0.2g样品放入哈希管中,加入5滴吊白块试剂(一)和10ml蒸馏水,混匀后盖紧瓶盖,放入沸水中加热5min,取出冷却至室温,用0.45μm微孔滤膜过滤,以除去悬浮颗粒,此为待测溶液。 3.空白

取10ml蒸馏水于10ml比色管中,加入吊白块试剂(二)1ml,混合均匀,放入恒温水浴锅中50℃加热15分钟,取出冷却至室温,移入1cm比色皿中,放入仪器相应比色池中,按操作指示面板区的“对照”键进行对照,对照完成后,仪器会自动记录对照结果,并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。

4.测量

移取处理好的样品溶液5ml于10ml比色管中,加入蒸馏水定容至10ml,然后再加入吊白块试剂(二)1ml,混匀后放入恒温水浴锅中50℃加热15分钟,取出冷却至室温,移入1 cm比色皿中,放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量,测量完成后,仪器自动显示样品中吊白块浓度值X(mg/kg)。

双氧水检测方法

1.试剂配置 双氧水试剂(一) 双氧水试剂(二)

注意:所有试剂均需避光、低温(冰箱4℃)保存!双氧水试剂(一)有腐蚀性,双氧水试剂(二)有毒。 2.样品处理

准确称取1.0g样品放入哈希管中,加2ml双氧水试剂(一)和6ml蒸馏水,混匀后盖紧瓶盖,放入恒温水浴锅50℃下加热10min,取出冷却至室温,用0.45μm微孔滤膜过滤,滤液移入10ml比色管中,加0.2ml双氧水试剂(二),再加蒸馏水至10ml刻度,此为待测溶液。 3.空白

向比色管中加入2ml双氧水试剂(一)和0.2ml双氧水试剂(二),再加蒸馏水至10ml刻度,混匀,转入1cm比色皿,放入仪器相应比色池中,按操作指示面板区的“对照”键进行对照,对照完成后,仪器会自动记录对照结果,并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。 4.测量

向待测液中加入2ml双氧水试剂(一)和0.2ml双氧水试剂(二),再加蒸馏水至10ml刻度,摇匀,转入1cm比色皿中,放入仪器比色池中进行测量,测量完成后,仪器会自动显示样品浓度结果

X(mg/kg)。

亚硝酸盐检测方法

1.试剂配置

亚硝酸盐试剂(一):加少量热蒸馏水溶解,冷却后定容于50mL容量瓶。 亚硝酸盐试剂(二):加蒸馏水溶解,定容于50mL容量瓶。

亚硝酸盐试剂(三):将两种亚硝酸盐试剂(三)溶于少量热水中,冷却后定容于50ml容量瓶。

亚硝酸盐试剂(四):将亚硝酸盐试剂(四)①加亚硝酸试剂(四)②定容于100mL棕色容量瓶,避光保存。

亚硝酸盐试剂(五):加蒸馏水溶解,定容于100mL棕色容量瓶,避光保存。

注意:除试剂(一)需常温保存外所有试剂均需避光、低温(冰箱4℃)保存!亚硝酸盐试剂(一)容易析出,请用50℃左右水浴加热1分钟后使用。配制好的亚硝酸盐试剂(五)有腐蚀性,可放置一个月左右,溶液变绿后不能使用。 2.样品处理

准确称取0.1g经搅碎混匀的试样,置于哈希管中,加入1mL亚硝酸盐试剂(一)和5mL的蒸馏水,密闭后于沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温,然后一面转动一面加入1mL亚硝酸盐试剂(二),摇匀,再加入1mL亚硝酸盐试剂(三),以沉淀蛋白质。加水至10ml刻度,摇匀,放置0.5小时,除去上层脂肪,余液用0.45μm微孔滤膜过滤,滤液备用。 3.对照测试

取5ml蒸馏水于10ml比色管中,加入0.1mL亚硝酸盐试剂(四),混匀,放置5min后加入0.2ml试剂(五),混匀,静置15分钟,转入1cm比色皿,放入仪器相应比色池中,按操作指示面板区的“对照”键进行对照,对照完成后,仪器会自动记录对照结果,并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。

4.样品测定

取5ml待测溶液于10ml比色管中,加入0.1亚硝酸盐试剂(四)混匀,放置5min后加入0.2ml试剂(五),混匀,静置15分钟,转入1cm比色皿,放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量,测量完成后,仪器自动显示样品中亚硝酸盐浓度值X(mg/kg)。

六价铬检测方法

1.试剂配置

六价铬试剂(一):加蒸馏水稀释,定容于100mL容量瓶 六价铬试剂(二):加蒸馏水稀释,定容于100mL容量瓶

六价铬试剂(三):加蒸馏水稀释,定容于100mL容量瓶 六价铬试剂(四):加蒸馏水稀释,定容于100mL容量瓶

六价铬试剂(五):将六价铬试剂(五)①溶解于六价铬试剂(五)②中,加水稀释至100ml,储存于棕色瓶中置冰箱内保存。

注意:所有试剂均需避光、低温(冰箱4℃)保存!六价铬试剂(一)、六价铬试剂(二)、六价铬试剂(三)、六价铬试剂(四)有腐蚀性;当配制好的六价铬试剂(五)溶液色变深后不能使用。 2.样品处理 操作步骤

① 将待测的粮食、蔬菜、水果类样品洗净晾干,碾碎,混匀备用。禽蛋、水产等洗净、晾干,取可食部分,混匀备用。

② 取经过预处理的均匀样品1.000g于哈希管中(敞开),加入2.0mL试剂(一)纯硝酸,4.0mL试剂(二)过氧化氢溶液,轻轻摇匀,放入亚临界水萃取仪中,从温度升到140℃时开始计时,保持恒温lh,同时做试剂空白,取出哈希管待自然冷却后,将消解液移入l0mL比色管中,将哈希管用水洗净,合并洗液于比色管中,用水稀释至10ml刻度,混匀、待测。

3.对照测试

取10ml蒸馏水于10ml比色管中,向比色管内加入0.1ml六价铬试剂(三)和六价铬试剂(四),混匀,再加入0.4ml试剂(五)摇匀,放置10min后,转入1cm比色皿,放入仪器相应比色池中,按操作指示面板区的“对照”键进行对照,对照完成后,仪器会自动记录对照结果,并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。

4.样品测定

取待测溶液,加蒸馏水稀释至刻度,再向比色管内加入0.1ml六价铬试剂(三)和六价铬试剂(四),混匀,再加入0.4ml试剂(五)摇匀,放置10min后,转入1cm比色皿,放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量,测量完成后,仪器自动显示样品中六价铬浓度值X(mg/kg)。

重金属检测方法

1.试剂配置 重金属试剂(一) 重金属试剂(二)

重金属试剂(三):加少量蒸馏水溶解,定容于100ml容量瓶 重金属试剂(四):加少量蒸馏水溶解,定容于100ml容量瓶

注意:所有试剂均需避光、低温(冰箱4℃)保存!重金属试剂(一)、重金属试剂(二)有

腐蚀性。 2.样品处理 操作步骤

③ 将待测的粮食、蔬菜、水果类样品洗净晾干,碾碎,混匀备用。禽蛋、水产等洗净、晾干,取可食部分,混匀备用。

④ 取经过预处理的均匀样品1.0g于哈希管中,加入2mL重金属试剂(一),2mL重金属试剂(二),4ml蒸馏水,轻轻摇匀,盖紧上盖,放入超声波提取仪中提取10分钟,取出哈希管待自然冷却后,打开上盖,过滤将溶液移入10ml比色管中,加重金属试剂(四)调节溶液PH=9,加水至刻度,此为待测溶液。

3.对照测试

取10ml蒸馏水于比色管内,加入1ml重金属试剂(三),混匀,放置10min后,转入1cm比色皿,放入仪器相应比色池中,按操作指示面板区的“对照”键进行对照,对照完成后,仪器会自动记录对照结果,并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。

4.样品测定

取待测溶液,加蒸馏水稀释至刻度,再向比色管内中加入1ml重金属试剂(三),混匀,放置10min后,转入1cm比色皿,放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量,测量完成后,仪器自动显示样品中重金属浓度值X(mg/kg)。

二氧化硫检测方法

1.试剂配置

二氧化硫试剂(一):加蒸馏水溶解,定容于500ml容量瓶 二氧化硫试剂(二):加蒸馏水溶解,定容于50ml容量瓶 二氧化硫试剂(三)

二氧化硫试剂(四):加蒸馏水溶解,定容于50ml容量瓶

二氧化硫试剂(五):将两种二氧化硫试剂(五)混合,用热水溶解,冷却后定容于50ml容量瓶 二氧化硫试剂(六):将二氧化硫试剂(六)①溶解定容于50ml容量瓶中,取出20ml于100ml容量瓶中,滴加二氧化硫试剂(六)②混匀使溶液由红变黄,加水至刻度 二氧化硫试剂(七):加蒸馏水溶解,定容于50ml容量瓶 二氧化硫试剂(八)

注意:所有试剂均需避光、低温(冰箱4℃)保存!二氧化硫试剂(一)有毒,二氧化硫试剂(七)、二氧化硫试剂(八)有腐蚀性。 2.样品处理

2.1水溶性固体样如白砂糖称取1.0g,用少量水溶解,置于10ml比色管中,加入0.4ml二氧化硫

试剂(七),5分钟后加入0.4ml二氧化硫试剂(八),然后加入2ml二氧化硫试剂(一),加水至刻度,混匀,此为待测溶液。

2.2其他固体样如饼干、粉丝称取1.0g研磨均匀的试样,以少量水润湿并移入10ml比色管中,加入2ml二氧化硫试剂(一),浸泡4小时以上,若上层溶液不澄清可加入二氧化硫试剂(四)及二氧化硫试剂(五)各0.25ml,混匀,过滤,加水至刻度,此为待测溶液。

2.3液体试样如葡萄酒可直接吸取1mL,置于10ml比色管中,用少量水稀释,加入2ml二氧化硫试剂(一),摇匀,最后加水至刻度,混匀,此为待测溶液。 3.空白

取一支干净的10mL比色管,准确加入二氧化硫试剂(一)10ml,1ml二氧化硫试剂(二),1ml二氧化硫试剂(三)及1ml二氧化硫试剂(六),混匀,放置20分钟后,转入1cm比色皿,放入仪器相应比色池中,按操作指示面板区的“对照”键进行对照,对照完成后,仪器会自动记录对照结果,并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。

4.测量

取待测溶液5ml于10mL比色管中,加入二氧化硫试剂(一)至10ml刻度,再加入1ml二氧化硫试剂(二),1ml二氧化硫试剂(三)及1ml二氧化硫试剂(六),混匀,放置20分钟后,转入1cm比色皿,放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量,测量完成后,仪器自动显示样品中二氧化硫浓度值X(mg/kg)。 备注:本仪器在室温20°左右测量最准确。

附录1常见故障及原因

如果操作不当,相应的会出现下列出错提示信息。都可按 取消返回。

下表中若未说明生产问题的原因,则与错误提示信息相同。

错误提示信息 对照测试错误 查询单号输入错误 附录2各物质限量标准 限量标检测指标 品名 准mg/kg 农药残留 蔬菜、水果 水发产品 水产品 ≤50% ≤10 不得检出 不得添加 ≤24 ≤14 ≤2 ≤7 ≤4 ≤3 ≤6 ≤1 ≤48 不得检出 不得检出 产生问题原因 酶的活性不高;温度太低 查询单号输入的数据大于总数据量 零食 大麦粉 小麦粉 甲醛 绿豆粉 棉白糖 白砂糖 红糖 腐竹 粉丝 鳕鱼肉 吊白块 面粉、米粉、豆制品 双氧水 水发品、肉制品、干果、椰果

食盐、牛乳粉 鲜肉、鲜鱼、粮食 蔬菜 亚硝酸盐 鲜蛋类 香肠、腊肠、香肚、腌菜、火腿 肉制品、火腿肠、灌肠 肉罐头 西式火腿、罐头 六价铬 粮食、蔬菜、水果、皮蛋、盐蛋 ≤2 ≤3 ≤4 ≤5 ≤20 ≤30 ≤50 ≤70 不得检出 不得检出 不得检出 ≤50 ≤50 ≤30 ≤50 ≤15 ≤100 ≤50 ≤50 ≤500 重金属 粮食、蔬菜、水果、皮蛋、盐蛋 银耳、莲子、龙眼、荔枝、虾仁、米粉、豆芽、生姜 白糖 竹笋、蘑菇及罐头 薯类淀粉 二氧化硫 葡萄、黑加仑浓缩汁 果汁浓浆 食糖、饼干、粉丝 发酵酒、葡萄酒、果酒 婴幼儿铁强化糖果 蜜饯、果脯

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