正丁醇在制备用于活检组织标本脱水和透明制片的低毒脱水剂中的应

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 CN 110823665 A(43)申请公布日 2020.02.21

(21)申请号 201911182156.5(22)申请日 2019.11.27

(71)申请人 李雄

地址 537110 广西壮族自治区贵港市港北

区中山中路1号院1幢2单元402室(72)发明人 李雄　

(74)专利代理机构 北京智客联合知识产权代理

事务所(特殊普通合伙) 11700

代理人 李戍(51)Int.Cl.

G01N 1/30(2006.01)G01N 1/36(2006.01)G01N 1/28(2006.01)

权利要求书1页 说明书3页

CN 110823665 A(54)发明名称

正丁醇在制备用于活检组织标本脱水和透明制片的低毒脱水剂中的应用(57)摘要

本发明公开了正丁醇在制备用于活检组织标本脱水和透明制片的低毒脱水剂中的应用。本发明的有益效果为：一是解决目前病理科长期使用有毒试剂二甲苯的问题，本专利使用的方法直接弃用二甲苯，使用无毒的正丁醇替代，既保护就技术人员的工作环境安全，又简化了操作程序。二是正丁醇既有透明作用又有脱水作用，正丁醇脱水作用较温和，传统脱水使用脱水作用较强的乙醇，其中无水乙醇对组织有脆化作用，浸泡过久，组织容易出现收缩和变脆，给切片带来困难，使用温和的正丁醇替换乙醇，优点的组织不易出现收缩和变脆。

CN 110823665 A

权　利　要　求　书

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1.正丁醇在制备用于活检组织标本脱水和透明制片的低毒脱水剂中的应用。

2.根据权利要求1所述的正丁醇在制备用于活检组织标本脱水和透明制片的低毒脱水剂中的应用，其特征在于，制片方法包括以下步骤：

1)组织固定：

将活检组织标本置于4％中性甲醛中，固定2-5小时；2)组织固定兼脱水：

将固定后的标本依次放入正丁醇和等量的100％乙醇液中，每缸1小时，一共2缸；3)组织脱水及透明：以单纯的正丁醇4缸，每缸浸泡1小时到1.5个小时；4)组织浸蜡：

将组织依次放入3缸石蜡，每缸1-2个小时，即可得到用于活检组织标本脱水的透明制片。

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说　明　书

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正丁醇在制备用于活检组织标本脱水和透明制片的低毒脱水

剂中的应用

技术领域

[0001]本发明涉及病理检测技术领域，具体涉及正丁醇在制备用于活检组织标本脱水和透明制片的低毒脱水剂中的应用。

背景技术

[0002]目前，我国各大医院病理科最常采用的活检组织标本脱水和透明，选择的是乙醇-二甲苯处理法，乙醇脱水能力较强，穿透速度很快，对组织有较明显的收缩作用，所以在使用乙醇时必须从低浓度到高浓度，一般为75％-85％-90％-95％-100％。脱水后组织进入二甲苯进行透明，二甲苯透明速度快，收缩力强，2-3毫米厚的组织在二甲苯中30-60分钟即可使组织透明。

[0003]乙醇和二甲苯作用强、速度快，但是有两处比较明显的缺点。一是一旦乙醇的浓度不是从低到高，先从高浓度开始，组织表面很快硬化，导致组织内部水分不易脱去，最终导致组织不能完全脱水，后面的步骤无法进行；二是二甲苯有低毒性，二甲苯在2017年10月27日世界卫生组织国际癌症研究机构公布的3类致癌清单中，可经呼吸道、皮肤及消化道吸收进入人体，短期吸入高浓度二甲苯可出现眼及上呼吸道刺激症状、头晕、头痛、恶心、胸闷等，长期接触有神经衰弱综合征，女性有可能导致月经异常。皮肤接触常发生皮肤干燥、皲裂、皮炎等。发明内容

[0004]本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了正丁醇在制备用于活检组织标本脱水和透明制片的低毒脱水剂中的应用；用正丁醇替代乙醇和二甲苯，正丁醇脱水能力较温和，与无水乙醇混合使用，很少引起组织收缩，没有浓度要求，故更换试剂出错率也降低，正丁醇有脱水兼透明作用，故可不经二甲苯即可直接进行浸蜡和包埋，使操作人员避免接触二甲苯。

[0005]为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为：正丁醇在制备用于活检组织标本脱水和透明制片的低毒脱水剂中的应用。[0006]进一步的，上述的正丁醇在制备用于活检组织标本脱水和透明制片的低毒脱水剂中的应用，制片方法包括以下步骤：[0007]1)组织固定：将活检组织标本置于4％中性甲醛中，固定2-5小时。在组织病理学中为了能防止细菌的腐蚀和组织的自溶，保存细胞固有的物质，能凝固或沉淀细胞内或组织液，糖原等，使细胞或组织基本上保持与生活时的物质一样，使组织硬化，便于切块，就都必须进行及时的适当的和有效的固定。组织只有经过固定，才能完成随后的一系列的制作。甲醛是一种无色易溶的刺激性气体，甲醛的通过使蛋白质分子交联二产生固定作用；[0008]2)组织固定兼脱水：将固定后的标本依次放入正丁醇和等量的100％乙醇液中，每缸1小时，一共2缸。正丁醇既有透明作用又有脱水作用，正丁醇脱水作用较温和，组织不易

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说　明　书

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收缩。

3)组织脱水及透明：单纯的正丁醇4缸，每缸浸泡1小时到1.5个小时。组织脱水的

原理就是利用脱水剂将组织内的水分置换出来，以利于有机溶剂的渗入。[0010]4)组织浸蜡：将组织依次放入3缸石蜡，每缸1-2个小时。浸蜡目的是置换组织中的透明剂，代之的石蜡渗入组织内部，把软组织变为硬度合适的蜡块，以便切成薄片制成HE片。

[0011]本发明的有益效果为：一是解决目前病理科长期使用有毒试剂二甲苯的问题，本专利使用的方法直接弃用二甲苯，使用无毒的正丁醇替代，既保护就技术人员的工作环境安全，又简化了操作程序。二是正丁醇既有透明作用又有脱水作用，正丁醇脱水作用较温和，传统脱水使用脱水作用较强的乙醇，其中无水乙醇对组织有脆化作用，浸泡过久，组织容易出现收缩和变脆，给切片带来困难，使用温和的正丁醇替换乙醇，优点的组织不易出现收缩和变脆。

具体实施方式

[0012]实施例1：[0013]现有技术中，常规乙醇-二甲苯制片步骤为：[0014]1、组织固定：将活检组织标本置于4％中性甲醛中，固定2-5小时。甲醛是一种无色易溶的刺激性气体，甲醛的通过使蛋白质分子交联二产生固定作用。[0015]2、组织脱水：组织经固定后，含有大量水分。组织在透明浸蜡前必须进行脱水，就是用某些溶剂将组织内的水分逐渐置换出来，以利于透明剂和石蜡的渗入。乙醇是常用的脱水剂.脱水力强,能使组织硬化,并能与媒浸剂二甲苯较好的融合。但容易使组织收缩、变脆，尤以无水乙醇为甚。不要在高浓度乙醇中停留时间过长或温度过高。使用乙醇进行组织脱水通常是由低浓度向高浓度的梯度进行，常用的脱水顺序是：75％乙醇、85％乙醇、95％乙醇I、95％乙醇II、无水乙醇I、无水乙醇II、无水乙醇III。每缸1-2小时。[0016]3、组织透明：组织脱水后依次将组织放入3缸二甲苯中，每缸1-1.5个小时。二甲苯是常用的透明剂。二甲苯为无色透明的液体，易挥发，折光率为1.497，透明力强，使用不当易使组织收缩变脆。而且二甲苯是有毒试剂，是挥发性液体。[0017]4、组织浸蜡：将组织依次放入3缸石蜡，每缸1-2个小时。浸蜡目的是置换组织中的透明剂，代之的石蜡渗入组织内部，把软组织变为硬度合适的蜡块，以便切成薄片制成HE片。

[0018]本发明提供的正丁醇在制备用于活检组织标本脱水和透明制片的低毒脱水剂中的应用，制片方法包括以下步骤：[0019]1)组织固定：将活检组织标本置于4％中性甲醛中，固定2-5小时。在组织病理学中为了能防止细菌的腐蚀和组织的自溶，保存细胞固有的物质，能凝固或沉淀细胞内或组织液，糖原等，使细胞或组织基本上保持与生活时的物质一样，使组织硬化，便于切块，就都必须进行及时的适当的和有效的固定。组织只有经过固定，才能完成随后的一系列的制作。甲醛是一种无色易溶的刺激性气体，甲醛的通过使蛋白质分子交联二产生固定作用。，[0020]2)组织固定兼脱水：将固定后的标本依次放入正丁醇和等量的100％乙醇液中，每缸1小时，一共2缸。正丁醇既有透明作用又有脱水作用，正丁醇脱水作用较温和，组织不易

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[0009]

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收缩。

3)组织脱水及透明：单纯的正丁醇4缸，每缸浸泡1小时到1.5个小时。组织脱水的

原理就是利用脱水剂将组织内的水分置换出来，以利于有机溶剂的渗入。[0022]4)组织浸蜡：将组织依次放入3缸石蜡，每缸1-2个小时。浸蜡目的是置换组织中的透明剂，代之的石蜡渗入组织内部，把软组织变为硬度合适的蜡块，以便切成薄片制成HE片。

[0023]本实施例方法优点：[0024]1、正丁醇具有透明的兼容性，不需要使用有毒二甲苯透明剂来透明组织，就可以直接进行浸蜡，减少二甲苯透明这一步骤，减少危害。[0025]2、正丁醇脱水有效防止蛋白质凝固，乙醇浓度控制不当容易造成的组织表面发硬，乙醇无法浸透到组织深处，造成脱水不佳，难以切片，同时处理过组织的乙醇含有大量组织脱下来的脂质和蛋白质，也在一定程度上影响脱水效果，而正丁醇比较温和，组织不易发硬发脆，也无浓度控制要求。[0026]3、本专利方法简单、稳定、方便、无毒、容易掌握，也是效果较好的方法之一。[0027]4、本方法在某医院病理科已经使用近30年，效果一直很好，值得推广。[0028]列表说明本发明与常规方法优缺点，如下表1所示：[0029]表1

[0021]

[0030]

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，

尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

[0031]

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