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将经过品质检查和稀释的新鲜*,盛于消毒过的干燥试管中,上面覆盖一层经过消毒的液体石蜡,然后加塞盖严,逐渐降低温度,当温度降到10~0℃时,即可进行保存。通用的保存方法是将盛*的试管放在装有冰块或井水的广口保温瓶内。如用冰块,应在冰块上铺一层棉花,将盛*的试管用薄层棉花外衬纱布裹好放在上面;如用井水,可将用棉花、纱布缠裹的试管放在一个较大的试管里,加塞盖紧,悬挂在瓶内水中。经过上述方法处理,盖好保温瓶塞,*温度即可逐步降低。
*保存时间的长短,决定于保存温度和其他一些可以影响精子存活率的外界条件。一般20℃可保存6小时左右,10℃可保存12小时以上,4℃可保存24小时以上,而以0~4℃保存效果最好。经过保存的*,使用时必须逐渐升高温度,在38~40℃进行检查,合格的才能输精。
精子对温度的改变非常敏感,保存*时要注意温度的骤变,以免影响成活率。稀释后的*降到保存的温度要1小时以上。无论升温或降温,每半小时温度变化5℃。
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*的保存按保存温度可分为常温(10~14℃)保存、低温(0~5℃)保存、冷冻(-79~-196℃)保存。
(1)常温保存
用于常温保存的*,可用含有明胶的稀释液进行稀释。将稀释好的*盛于无菌、干燥的试管中,然后加塞盖严,封蜡隔绝空气即可。该法保存48小时,活力为原*的70%。
RH明胶液配方:柠檬酸钠3克,磺胺甲基嘧啶钠0.15克,后莫氨磺酰0.1克,明胶10克,蒸馏水100毫升。
(2)低温保存
低温保存时要注意缓慢降温。可以将盛*的试管外边包上棉花,再装入塑料袋内,然后放入冰箱中。一般此法可保存1~2天。
(3)冷冻保存
将*用乳糖、卵黄、甘油稀释液按1∶1~3稀释后,放入冰箱(3~5℃)平衡2~4小时。然后,在装满液氮的广口保温瓶上,放一铜纱网(距液氮1~2厘米)。几分钟后待温度降至恒温时,将*用滴管或细管逐滴滴在纱网上,滴完后经3~5分钟,用小勺刮取颗粒,收集好,立即放入液氮中保存,作好标签进行标记。冷冻精粒在超低温条件下,可长年保存而不变质。
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