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如何利用已知基因设计特异性引物?

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首先在NCBI进行blast比对,找到基因的特异序列,与其他基因同源性低的区域,然后再这些区域设计引物。
还有一种方法是先在基因上设计引物,然后再blast比对引物,看看在你的目的物种中是否有同源基因。追问是不是如果我的引物与目标物种具有同源性,这对引物的特异性就比较好啊?

追答如果除了你的目的基因,还跟目标物种中的其他基因能比对上,那就是说明你的引物对于你的目的基因不是特异的.因为它有可能跟其他基因配对,所以不特异.特异是只能跟你的基因配对,不能跟其他基因配对~~

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