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细胞冻存时为加入保护液,是为了保护细胞免受溶液损伤和冰晶损伤。
加入保护液后可以使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内的水分透出,减少了冰晶的形成,从而避免细胞的损伤。采用慢冻快融的方法能较好地保证细胞存活。
保护液类型有甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。
注意事项:
1.DMSO不用高压灭菌;DMEM不能高温高压灭菌,可以过滤除菌。
2.DMSO要用新的,而且要避光保存。
3.DMSO:含10%FBS的DMEM=1:9(体积比)。
以上内容参考:
百度百科--冻存保护剂